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            熒光定量PCR技術(shù)簡介

            作者:佚名      來源:NET/DXZM     點(diǎn)擊:      時(shí)間:2005/9/14 9:26:03

             熒光定量PCR技術(shù)簡介   

                 我室自1996年開展了常規(guī)PCR技術(shù),雖然具有很高的特異性和靈敏性,但仍有一些缺陷:①由于采用終點(diǎn)法檢測,無法實(shí)現(xiàn)定量檢測;②采用電泳法觀察結(jié)果,極易造成污染;③不易進(jìn)行質(zhì)控;④結(jié)果判斷有時(shí)會(huì)受非特異性擴(kuò)增帶的干擾等等,傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床的需要。
                近日我室引進(jìn)國內(nèi)最先進(jìn)的熒光定量PCR檢測系統(tǒng),它是國際上最新研制的一種核酸定量技術(shù),該技術(shù)在PCR反應(yīng)系統(tǒng)中引入了熒光標(biāo)記探針,具有高靈敏性、高特異性、和高精確性的特點(diǎn)。目前已被應(yīng)用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達(dá)、突變和多態(tài)性研究等多個(gè)領(lǐng)域。
                熒光定量PCR(簡稱FQ-PCR)由美國PE公司1995年研制成功,該技術(shù)是在常規(guī) PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針來實(shí)現(xiàn)其定量功能的,與普通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點(diǎn):
            1、 封閉反應(yīng),無需PCR后處理。
            2、 特異性強(qiáng),靈敏度高。
            3、 采用對數(shù)期分析,摒棄終點(diǎn)數(shù)據(jù),定量準(zhǔn)確。
            4、 定量范圍寬,可達(dá)到10個(gè)數(shù)量級。
            5、 儀器在線式實(shí)時(shí)檢測,結(jié)果直觀,避免人為判斷。
            6、 可實(shí)現(xiàn)一管雙檢或多檢。
            7、 操作安全,縮短時(shí)間,提高效率。
                熒光定量PCR是一個(gè)方法,我們可根據(jù)臨床科室的不同要求開展檢測項(xiàng)目歡迎臨床醫(yī)生積極與我們聯(lián)系,以有利于疾病的診斷和科研課題的研究。目前已開展的檢測項(xiàng)目有:乙肝病毒DNA定量檢測(靜脈血2毫升、乳汁2毫升)
            巨細(xì)胞病毒DNA定量檢測(靜脈血2毫升)
            肺炎支原體DNA定量檢測(靜脈血2毫升)
            生殖道淋球菌DNA定量檢測(分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水)
            生殖道沙眼衣原體DNA定量檢測(分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水)
            生殖道解脲支原體DNA定量檢測(分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水)
            人乳頭瘤病毒DNA定量檢測( HPV-6,-11,-16,-18)(分泌物棉拭子+1毫升生理鹽水)
                    2005.04.01 

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